Sistema de Submissão de Resumos, I Encontro de Iniciação Científica - 2011 (ENCERRADO)

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Estudo do gene AtMo25 em Arabidopsis thaliana
Fernanda Marisca Bizotto, Hana Paula Masuda

Última alteração: 2011-09-08

Resumo


Bizotto, F. M.1, Alves-Ferreira, M.2, Hemerly, A.S.3,  Masuda, H.P.1

1Centro de Ciências Naturais e Humanas, UFABC; 2 Dept. Genética, IB, UFRJ; 3 Inst. Bioquímica Médica, UFRJ. 

INTRODUÇÃO: O gene Mo25 foi primeiramente identificado no estágio inicial de clivagem da embriogênese de ratos e posteriormente observou-se que ele é conservado em todos eucariotos. Foi demonstrado que a proteína MO25 está ligada à polarização das células e à divisão celular em organismos como Schizosaccharomyces pombe, Drosophila melanogaster e humanos.  Em S. pombe, MO25 localiza-se nos fusos mitóticos. Dados do nosso grupo mostraram que plantas que superexpressam ABAP1 (ABAP1SE), proteína que regula a replicação do DNA, apresentam a primeira divisão mitótica assimétrica dos gametófitos masculinos alterada. Este problema durante a gametogênese pode ter ocorrido devido a não polarização celular do gametófito. Curiosamente, um dos genes reprimido em plantas ABAP1 SE foi um homólogo ao Mo25 (At2g03410). Em Arabidopsis thaliana, MO25 constitui uma família protéica formada por 4 genes: At2g03410 (AtMo25), At4g17270, At5g18940 e At5g47540.

OBJETIVOS: Analisar o perfil de expressão gênica de AtMo25 de Arabidopsis thaliana utilizando ferramentas de bioinformática e isolar a região promotora de AtMo25 para futuramente clonar em um vetor fusionado com o gene reporter GUS e inseri-lo em plantas.

METODOLOGIA: O perfil de expressão gênica de AtMo25 e de seus homólogos foram analisados utilizando os bancos de dados do Genevestigator e AGFP. Para o isolamento da região promotora de AtMo25, nós extraímos DNA genômico de A. thaliana, amplificamos por PCR usando primers específicos para a clonagem no vetor pDONR221 utilizando a tecnologia Gateway de clonagem.

RESULTADOS: AtMo25 e At5g47540 possuem expressão preferencial no grão de pólen (gametófito masculino), enquanto os outros dois genes homólogos a Mo25, At4g17270 e At5g18940, não apresentaram a expressão específicos em grãos de pólen. Foram encontrados dois sítios de ligação a fatores transcricionais exclusivos de AtMo25 e At5g47540, sugerindo que esses FT podem estar relacionados ao perfil de expressão destes genes em gametófitos masculinos maduros.  Conseguimos também amplificar a região promotora do gene AtMo25 e inserir adaptadores para inserção no vetor bacteriano pDONR 221.

CONCLUSAO: Foi possível identificar quatro genes homólogos a MO25 em Arabidopsis thaliana, sendo que dois deles possuem perfil de expressão gênica semelhante entre si, ao passo que os outros dois também se assemelham quanto ao perfil de expressão gênica. Conseguimos também amplificar a região promotora do gene AtMo25 e inserir adaptadores para inserção no vetor bacteriano pDONR 221.